ขั้นตอน
หากทำการทดสอบ Coombs โดยตรงสีแดง เลือด เซลล์จะถูกกรองออกจากเลือดของผู้ป่วย จะต้องมีการทดสอบว่ามี แอนติบอดี ของชนิด IgG กับพวกมันซึ่งทำให้เกิดโรคโลหิตจางเม็ดเลือดหรือ เลือด ความไม่ลงรอยกันของกลุ่มในร่างกาย Coombs serum ประกอบด้วย แอนติบอดี ต่อต้านแอนติบอดี IgG ของมนุษย์
ส่วนผสมได้รับความร้อน (บ่ม) เป็นเวลานานขึ้น ถ้ามี แอนติบอดี บนสีแดง เลือด เซลล์จะรวมตัวกันเป็นก้อนและการทดสอบจะเป็นบวก การทดสอบ Coombs ทางอ้อมประกอบด้วยสองส่วน
จุดมุ่งหมายคือการตรวจหาแอนติบอดีที่มีอยู่อย่างอิสระในเลือดและไม่ผูกพันกับเซลล์เม็ดเลือด คราวนี้ส่วนที่เป็นของเหลว (ซีรั่ม) จะถูกกรองออกจากเลือดของผู้ป่วย ขั้นแรกให้เพิ่มเม็ดเลือดแดงลงในซีรั่มเพื่อทำการทดสอบ
หากมีแอนติบอดีอิสระในซีรั่มสิ่งเหล่านี้จะจับกับเซลล์เม็ดเลือดแดง ปฏิกิริยานี้มองไม่เห็น เฉพาะในขั้นตอนที่สองเช่นเดียวกับการทดสอบคูมบ์สโดยตรงคูมบ์สซีรั่มที่มีแอนติบอดีต่อแอนติบอดีของมนุษย์จะถูกเพิ่มและให้ความร้อน หากผลลัพธ์เป็นบวกการแก้ปัญหาจะรวมตัวกันด้วย
การประเมินผล
เมื่อแอนติบอดีรวมกับ Cooms serum ที่ตรงกันแอนติบอดีของซีรั่ม (ส่วนที่เป็นของเหลวของเลือด) จะจับกับแอนติบอดีของผู้ป่วย แอนติบอดีมีโครงสร้างรูปตัว Y ซึ่งหมายความว่าพวกมันสามารถผูกคู่หูสองคนได้เสมอและทำให้เซลล์เม็ดเลือดแดงเชื่อมโยงกัน ส่งผลให้เกิดการสะสมของเม็ดเลือดจำนวนมาก
กระจุกเหล่านี้สามารถมองเห็นได้ - การรวมตัวกันของเลือด (กระจุก) และการทดสอบเป็นบวก หากผู้ป่วยไม่มีแอนติบอดีซีรั่มจะยังคงเป็นของเหลว ไม่สามารถเห็นการเปลี่ยนแปลงได้ - การทดสอบเป็นลบ
ทางเลือกคืออะไร?
ทางเลือกที่จะ การทดสอบคูมบ์ส เป็นขั้นตอน ELISA ทางภูมิคุ้มกัน (Enzyme-linked Immunosorbent Assay) ซึ่งแอนติบอดีบางชนิดถูกทำเครื่องหมายด้วยเอนไซม์ แอนติบอดีนี้จะถูกเพิ่มเข้าไปในสารละลายทดสอบ หากแอนติบอดีที่ติดฉลากทำปฏิกิริยากับแอนติบอดีของสารละลายทดสอบเอนไซม์ที่ถูกจับจะถูกกระตุ้นและสร้างสีย้อม
หลอดทดลองที่สอดคล้องกันเปลี่ยนสี - การทดสอบเป็นบวก นอกจากขั้นตอน ELISA แล้วยังมี WESTERN-Blot ซึ่งมักใช้เป็นการทดสอบยืนยัน ELISA ที่เป็นบวก
