การวิเคราะห์ส่วนที่แช่แข็ง
นี่เป็นสิ่งจำเป็นหากศัลยแพทย์ต้องการข้อมูลเกี่ยวกับเนื้อเยื่อที่ถูกลบออกในระหว่างการผ่าตัดเพื่อตัดสินใจเกี่ยวกับขั้นตอนของขั้นตอน ตัวอย่างเช่นเนื้องอกมะเร็งขนาดเล็กจะถูกลบออกจาก ไต. ตอนนี้จำเป็นต้องมีการผ่าอย่างรวดเร็วเพื่อดูว่าเนื้องอกได้ถูกลบออกไปหมดแล้วหรือยังมีเนื้อเยื่อมะเร็งจำนวนมากที่ขอบของตัวอย่างเนื้อเยื่อหรือไม่
ในท้ายที่สุดผลของการตรวจส่วนที่ถูกแช่แข็งจะเป็นตัวกำหนดแนวทางของการผ่าตัดและแผนการบำบัดต่อไปของผู้ป่วย การตรวจส่วนแช่แข็งทำงานอย่างไร? ภายใน 10 นาทีเนื้อเยื่อจะคงตัวโดยการแช่แข็งที่อุณหภูมิ -20 ° C จากนั้นจะทำรอยบากหนา 5-10 μmบนสิ่งที่เรียกว่า microtome นี้วางบนสไลด์แผ่นกระจกขนาดเล็กและเปื้อนอย่างรวดเร็ว ในตอนท้ายผลการวิจัยจะถูกตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์และสามารถส่งผลไปยังห้องผ่าตัดได้ทันที
วิธีการย้อมสี
วิธีการย้อมสีทางเนื้อเยื่อจำนวนมากได้พัฒนาขึ้นในช่วง 120 ปีที่ผ่านมา โครงสร้างของเซลล์และเนื้อเยื่อแบ่งออกเป็นเซลล์ basophilic, acidophilic และ neutrophil โดยอาศัยปฏิกิริยาของสีกับสารย้อมสี นอกจากนี้ยังมีโครงสร้าง agyrophilic และ nucleophilic
Basophilic ย้อมทุกสิ่งที่มีกลุ่มกรดและย้อมด้วยสีย้อมพื้นฐาน (เช่น hematoxylin หรือ methylene blue) โครงสร้างที่เป็นกรดเป็นพื้นฐานดังนั้นจึงสามารถย้อมสีด้วยการกัดเซาะหรือกรดฟุคซิน (สีย้อมกรด) ซึ่งรวมถึงไซโทพลาสซึมและ คอลลาเจน เส้นใย.
ส่วนประกอบของนิวโทรฟิลิกหรือไลโปฟิลิกไม่สามารถทำปฏิกิริยากับสีย้อมที่เป็นกรดหรือสีพื้นฐานดังนั้นจึงไม่สามารถย้อมสีได้ ส่วนประกอบของ Agyrophilic สามารถผูกไอออนเงินและเปลี่ยนเป็นธาตุเงินได้ ปฏิกิริยาสีนิวคลีโอฟิลิก (นิวเคลียส = นิวเคลียสของเซลล์, เซลล์ที่รักนิวเคลียส) เป็นผลมาจากสีย้อมนิวคลีโอฟิลิกใน นิวเคลียสของเซลล์สิ่งเหล่านี้คือการจับกับดีเอ็นเอหรือสารพื้นฐานที่จับกับกรดนิวคลีอิก
ปัจจุบันวิธีการย้อมสีด้วยสารเคมีที่ได้รับการทดลองอย่างดีได้รับการเสริมด้วยวิธีการทางภูมิคุ้มกัน ปฏิกิริยาแอนติเจน - แอนติบอดีถูกใช้ในเทคนิคนี้เพื่อตรวจหาคุณสมบัติบางอย่างของเซลล์ จากนั้นปฏิกิริยาสามารถมองเห็นได้ด้วยเทคนิคที่ซับซ้อน
วิธีการย้อมสีที่ใช้บ่อย ได้แก่ : การย้อมสี HE = การย้อมสีฮีมาทอกซิลิน - อีโอซิน: เฮมาทอกซิลินสีย้อมธรรมชาติย้อมโครงสร้างทั้งหมดเป็นสีน้ำเงินซึ่งเป็นเบส (= ฐานที่ชอบ) และเป็นกรดเช่น DNA นิวเคลียสของเซลล์ ไรโบโซมในทางกลับกัน Eosin ผลิตขึ้นจากวัสดุสังเคราะห์ Eosin ทำให้โครงสร้างของเซลล์เป็นสีแดงถ้าเป็นกรด (= เป็นกรด - รัก) หรือเป็นพื้นฐาน
พื้นที่ โปรตีน ของไซโทพลาซึม mitochondriaและ คอลลาเจน อยู่ในหมู่พวกเขา การย้อมสี Azan: ประกอบด้วยตัวอักษรตัวแรกของทั้งสองสี azocarmine G และ aniline blue-gold orange: คราบนี้ นิวเคลียสของเซลล์ และเส้นใยกล้ามเนื้อเป็นสีแดงและไซโทพลาซึมมีสีแดง คอลลาเจน และเส้นใยร่างแหจะเปลี่ยนเป็นสีน้ำเงินในการย้อมสีนี้
คราบ Giemsa (Azure-Eosin-Methylene Blue ของ Giemsa) ใช้ในการย้อมสี เลือด รอยเปื้อนของเซลล์ นิวเคลียสของเซลล์สามารถรับรู้ได้ง่ายจากปฏิกิริยาสีม่วง ไซโทพลาซึมมีคราบสีน้ำเงิน
ในการย้อมสีอีลาสติก (resorcinol-fuchsin-orcein) เส้นใยยืดหยุ่นทั้งหมดจะแสดงเป็นสีดำ - ม่วง วิธีการย้อมสี van Gieson มีลักษณะเฉพาะคือการย้อมสีครั้งแรกด้วย hematoxylin จากนั้นใช้กรดพิคริกฟูซิน (ไมโครฟูซิน) หรือกรดพิคริกไทอาซีน
ในที่สุดนิวเคลียสของเซลล์จะปรากฏเป็นสีน้ำตาลดำส่วนไซโทพลาสซึมจะปรากฏเป็นสีน้ำตาลอ่อน การต่อต้านกรดพิคริกไธอาซีนจะทำให้เส้นใยยืดหยุ่นและเนื้อเยื่อของกล้ามเนื้อมีสีเหลืองอมส้มและเส้นใยคอลลาเจนเป็นสีแดง ในการย้อมสีไตรโครเมี่ยมตาม Masson-Goldner ขนาดของโมเลกุลสีย้อมเป็นปัจจัยที่สำคัญที่สุดในวิธีการย้อมสี
มีการใช้เหล็ก hematoxiline โดยปกติจะมีสีย้อมเพิ่มเติมสามสี ได้แก่ กรดฟ็อกซ์สีส้ม G และสีเขียวอ่อน มันเปื้อนคอลลาเจน เนื้อเยื่อเกี่ยวพัน และเมือกสีเขียวนิวเคลียสของเซลล์สีน้ำเงิน - ดำไซโทพลาสซึมสีแดงกล้ามเนื้อซีดและแดง เลือด เซลล์ (เม็ดเลือดแดง) สีแดงอมส้ม นอกจากนี้ยังมีการย้อมสีแกรมซึ่งทำหน้าที่ในการแยกความแตกต่าง แบคทีเรีย.
แกรมบวก แบคทีเรีย มีคราบสีน้ำเงินและแบคทีเรียแกรมลบย้อมสีแดง นอกจากนี้ยังใช้การย้อมสี Ziehl-Neelsen แบคทีเรียได้แก่ สารที่ทนกรดและตัวอย่างเช่น วัณโรค เชื้อโรคเป็นสีแดง วิธีการย้อมสีอื่น ๆ ที่ควรกล่าวถึงในที่นี้คือปฏิกิริยาเบอร์ลิน - บลูซึ่งรับผิดชอบในการตรวจหาไอออนของเหล็กไตรวาเลนต์ในส่วนของเนื้อเยื่อและวิธีการย้อมสีของเหล็กเฮมาทอกซิลินตาม Heidenhain
