In situ hybridization เป็นวิธีการตรวจหาความผิดปกติของโครโมโซม มันเกี่ยวข้องกับการติดฉลากเฉพาะ โครโมโซม ด้วย flouroscent สีย้อม และผูกไว้กับการตรวจสอบดีเอ็นเอ เทคนิคนี้ใช้สำหรับการวินิจฉัยก่อนคลอดเกี่ยวกับการกลายพันธุ์ทางพันธุกรรม
การผสมพันธุ์ในแหล่งกำเนิดคืออะไร?
การผสมพันธุ์ในแหล่งกำเนิดเกี่ยวข้องกับการติดฉลากที่เฉพาะเจาะจง โครโมโซม ด้วย flouroscent สีย้อม และผูกไว้กับการตรวจสอบดีเอ็นเอ เทคนิคนี้ใช้สำหรับการวินิจฉัยก่อนคลอดของ ยีน การกลายพันธุ์ In situ hybridization หรือ การเรืองแสงในการผสมพันธุ์ในแหล่งกำเนิด เกี่ยวข้องกับการตรวจหาพันธุกรรมระดับโมเลกุลของ กรดนิวคลีอิก จาก RNA หรือ DNA ในเนื้อเยื่อเฉพาะหรือเซลล์ โดยปกติการวินิจฉัยประเภทนี้ใช้เพื่อตรวจหาความผิดปกติของโครโมโซมที่มีโครงสร้างหรือตัวเลข การตั้งครรภ์. เพื่อจุดประสงค์นี้จะใช้หัววัดที่ผลิตขึ้นเองซึ่งประกอบด้วยกรดนิวคลีอิก จากนั้นจะผูกกับไฟล์ กรดนิวคลีอิก ในสิ่งมีชีวิตโดยการจับคู่ฐาน การผูกนี้เรียกตามคำว่าการผสมพันธ์ การตรวจจับจะดำเนินการกับโครงสร้างที่อยู่อาศัยของผู้ป่วยดังนั้นจึงสอดคล้องกับการตรวจจับในแหล่งกำเนิด สิ่งที่แตกต่างไปจากนี้คือวิธีการในหลอดทดลองซึ่งการตรวจจับจะเกิดขึ้นในหลอดทดลอง วิธีนี้ได้รับการพัฒนาขึ้นในศตวรรษที่ 20 โดยนักวิทยาศาสตร์ Joe Gall และ Mary Lou Pardue เทคนิคมีการพัฒนาตั้งแต่นั้นมา ตัวอย่างเช่นในขณะที่ใช้หัววัดกัมมันตภาพรังสีหัววัดที่ติดฉลากด้วยสารเรืองแสงด้วยพันธะโควาเลนต์กับการติดฉลาก โมเลกุล ถูกนำมาใช้ในปัจจุบัน
ฟังก์ชันเอฟเฟกต์และเป้าหมาย
การผสมพันธุ์ในแหล่งกำเนิดมักใช้เพื่อตรวจจับความผิดปกติของโครโมโซมความผิดปกติของโครโมโซมที่ไม่สามารถตรวจพบได้ในคาริโอแกรม ดังนั้นจึงใช้วิธีนี้เสมอเมื่อต้องพิจารณาโรคทางพันธุกรรมในระหว่าง การตั้งครรภ์. เนื่องจากความผิดปกติของโครโมโซมเป็นปัญหาที่ไม่ควรมองข้ามในปัจจุบันการประยุกต์ใช้วิธีนี้จึงเพิ่มขึ้นเมื่อเวลาผ่านไป การผสมพันธุ์จะดำเนินการโดยใช้เซลล์พื้นเมืองจากแม่ น้ำคร่ำ. พื้นฐานของเทคนิคคือการจับหัววัดที่มีฉลากสีกับชิ้นส่วนดีเอ็นเอ ด้วยการเชื่อมต่อจึงสามารถใช้กล้องจุลทรรศน์เพื่อประเมินจำนวนสำเนาได้ในภายหลังเนื่องจากสำเนาแต่ละชุดจะปล่อยสัญญาณแสงและสามารถมองเห็นได้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ มีขั้นตอนที่แตกต่างกันสำหรับสิ่งนี้ การวิเคราะห์จะเกิดขึ้นทันทีหลังจากมีผลผูกพัน ในกรณีนี้สีย้อมฟลูโรสเช่น ไบโอติน ใช้ซึ่งเชื่อมต่อโดยตรงกับหัววัดดีเอ็นเอ ในวิธีการทางอ้อมของการผสมพันธุ์ในแหล่งกำเนิดการวิเคราะห์ไม่สามารถทำได้ทันทีหลังจากการผสมพันธ์เนื่องจากสารเรืองแสงสามารถจับกับหัววัดได้หลังจากการผสมพันธ์เท่านั้น วิธีทางอ้อมนี้นิยมใช้มากกว่าวิธีทางตรงเนื่องจากถือว่ามีความละเอียดอ่อนมากกว่า เทคนิครวมถึงการตรวจสอบดีเอ็นเอเซนโทรมิเตอร์เฉพาะโครโมโซม, การตรวจสอบดีเอ็นเอเฉพาะตำแหน่ง, การตรวจสอบไลบรารีดีเอ็นเอเฉพาะโครโมโซมและการผสมจีโนมเปรียบเทียบ สามารถใช้หัวตรวจ DNA centromere เฉพาะโครโมโซมเพื่อตรวจหาความผิดปกติของตัวเลขโครโมโซม นั่นคือส่วนใหญ่จะใช้เมื่อทำซ้ำหรือลบ โครโมโซม เป็นที่สงสัย การตรวจสอบดีเอ็นเอเฉพาะตำแหน่งส่วนใหญ่เหมาะสำหรับการตรวจหาการกลายพันธุ์ที่น้อยที่สุดซึ่งไม่สามารถตรวจพบได้ในคาริโอแกรม หัววัดไลบรารีดีเอ็นเอเฉพาะโครโมโซมถูกใช้โดยเฉพาะเพื่อตรวจหาการแทรกและการแปล ในทางกลับกันการผสมพันธุ์ของจีโนมเปรียบเทียบเป็นการวิเคราะห์ที่ครอบคลุมเกี่ยวกับการสูญเสียและการได้รับในวัสดุโครโมโซม ปัจจุบันการผสมพันธ์ในแหล่งกำเนิดมีความสำคัญอย่างยิ่งในการวินิจฉัยการกลายพันธุ์ของโครโมโซมต่างๆ ในการวินิจฉัยของ ดาวน์ซินโดรมตัวอย่างเช่นโพรบจับกับโครโมโซม 21 เพื่อจุดประสงค์นี้มักใช้โพรบเฉพาะโครโมโซมซึ่งสามารถใช้ได้ในกรณีที่สงสัยว่าเป็นโรคนี้ อาจเกิดความสงสัยเช่นหากพ่อแม่เคยให้กำเนิดลูกที่เป็นโรคนี้มาก่อนและ เสียงพ้น ภาพที่เห็นได้ชัดเจน หากมีการผูกสามครั้งมากกว่าการผูกสองครั้งส่งผลให้เกิดสัญญาณสามสีการวินิจฉัยจะได้รับการยืนยัน
ความเสี่ยงผลข้างเคียงและอันตราย
ซึ่งแตกต่างจาก PCR ตัวอย่างเช่นการผสมพันธุ์แบบในแหล่งกำเนิดมีความเสี่ยงต่อการปนเปื้อนน้อยกว่ามาก นอกจากนี้เวลาที่ต้องใช้ในการทำหัตถการนั้นน้อยกว่ามากอย่างไรก็ตามเนื่องจากตัวอ่อนในรูปแบบโครโมโซมโดยเฉพาะรูปแบบใด ๆ ที่มีอยู่จึงไม่สามารถใช้เพื่อสรุปความแน่นอนของโครโมโซมที่เหลือได้ การกระจาย และสถานะทางพันธุกรรมของเซลล์อื่น ๆ สัญญาณสีอาจทับซ้อนกันหรือมองไม่เห็นด้วยเหตุผลอื่น ๆ ดังนั้นการผสมพันธุ์ในแหล่งกำเนิดเป็นเครื่องมือวินิจฉัยระหว่าง การตั้งครรภ์ มีแนวโน้มที่จะเกิดข้อผิดพลาดได้ง่าย การวินิจฉัยผิดพลาดสามารถเกิดขึ้นได้และผู้ปกครองอาจตัดสินใจต่อต้านสุขภาพที่ดี เอ็มบริโอ. เพื่อลดความผิดพลาด - ความเด่นชัดของการผสมพันธุ์ในแหล่งกำเนิดควรตรวจเซลล์ตัวอ่อนอย่างน้อยสองเซลล์พร้อมกัน จากการตรวจสอบเซลล์สองเซลล์พร้อมกันขณะนี้มีความเสี่ยงเพียงเล็กน้อยเท่านั้นที่จะวินิจฉัยผิดพลาด ผู้ปกครองจึงสามารถวางใจในการวินิจฉัยในกรณีดังกล่าวได้ การผสมเทียมในแหล่งกำเนิดไม่ได้เสนอให้กับหญิงตั้งครรภ์ทุกคน แต่ให้เฉพาะกับผู้หญิงจากกลุ่มเสี่ยงเท่านั้น อย่างไรก็ตามสตรีมีครรภ์ไม่ได้รับการปฏิเสธการวินิจฉัยประเภทนี้ตามคำร้องขอของตนเอง ผิดปกติ เสียงพ้น การตรวจพบหรือซีรั่มที่ผิดปกติอาจแจ้งให้แพทย์เสนอขั้นตอนการวินิจฉัย ปัจจุบันการผสมพันธ์ในแหล่งกำเนิดสามารถใช้เพื่อวินิจฉัยความผิดปกติของโครโมโซมในสัดส่วนที่มากได้ แต่ไม่ได้หมายความว่าทั้งหมด ดังนั้นการผสมพันธ์ในแหล่งกำเนิดจะต้องไม่ทำเพียงอย่างเดียว แต่ต้องใช้ร่วมกับการทดสอบโครโมโซมแบบเดิมเสมอ การดูแลหญิงตั้งครรภ์มีบทบาทสำคัญในขั้นตอนนี้ ดังนั้นก่อนการวิเคราะห์จะมีการอภิปรายอย่างละเอียดเกี่ยวกับวิธีการวินิจฉัยกับมารดาที่มีครรภ์เพื่อแจ้งให้เธอทราบเกี่ยวกับความเสี่ยงความเป็นไปได้และข้อ จำกัด ของเทคนิค
