ลำดับดีเอ็นเอ | กรดดีออกซีไรโบนิวคลีอิก - DNA

การหาลำดับดีเอ็นเอ

ในการหาลำดับดีเอ็นเอจะใช้วิธีทางชีวเคมีเพื่อกำหนดลำดับของนิวคลีโอไทด์ (โมเลกุลฐานดีเอ็นเอที่มีน้ำตาลและฟอสเฟต) ในโมเลกุลของดีเอ็นเอ วิธีที่ใช้กันอย่างแพร่หลายคือวิธีการยกเลิกโซ่ Sanger เนื่องจาก DNA ประกอบด้วยสี่ฐานที่แตกต่างกันจึงมีแนวทางที่แตกต่างกันสี่วิธี

แต่ละวิธีประกอบด้วย DNA ที่จะจัดลำดับไพรเมอร์ (โมเลกุลเริ่มต้นสำหรับการจัดลำดับ) DNA polymerase (เอนไซม์ที่ขยาย DNA) และส่วนผสมของนิวคลีโอไทด์ที่ต้องการทั้งสี่ชนิด อย่างไรก็ตามในแต่ละวิธีทั้งสี่นี้ฐานที่แตกต่างกันจะได้รับการดัดแปลงทางเคมีในลักษณะที่สามารถรวมเข้าด้วยกันได้ แต่ไม่ได้เป็นจุดดำเนินการสำหรับ DNA polymerase สิ่งนี้จะนำไปสู่การยุติโซ่ วิธีนี้จะสร้างชิ้นส่วนดีเอ็นเอที่มีความยาวแตกต่างกันซึ่งจะถูกแยกทางเคมีด้วยสิ่งที่เรียกว่าเจลอิเล็กโตรโฟรีซิสตามความยาว การเรียงลำดับผลลัพธ์สามารถแปลเป็นลำดับของนิวคลีโอไทด์ในส่วนดีเอ็นเอที่เรียงลำดับได้โดยการติดฉลากแต่ละฐานด้วยสีเรืองแสงที่แตกต่างกัน

การผสมพันธุ์ของดีเอ็นเอ

การผสมพันธุ์ของดีเอ็นเอเป็นวิธีการทางพันธุกรรมระดับโมเลกุลที่ใช้เพื่อพิสูจน์ความคล้ายคลึงกันระหว่างดีเอ็นเอสายเดี่ยวสองสายที่มีแหล่งกำเนิดต่างกัน วิธีนี้ใช้ประโยชน์จากข้อเท็จจริงที่ว่า DNA double strand ประกอบด้วยสองเส้นเดี่ยวที่เสริมกันเสมอ ยิ่งเส้นเดี่ยวทั้งสองมีความคล้ายคลึงกันมากเท่าไหร่ฐานยิ่งสร้างการเชื่อมต่อที่มั่นคง (พันธะไฮโดรเจน) กับฐานตรงข้ามหรือยิ่งมีคู่เบสมากขึ้น

จะไม่มีการจับคู่ฐานระหว่างส่วนต่างๆบนสายดีเอ็นเอทั้งสองที่มีลำดับเบสที่แตกต่างกัน ตอนนี้สามารถกำหนดจำนวนสัมพัทธ์ของสารประกอบได้โดยการหาจุดหลอมเหลวที่สายคู่ของดีเอ็นเอที่สร้างขึ้นใหม่ถูกแยกออก ยิ่งจุดหลอมเหลวสูงเท่าใดฐานเสริมก็ยิ่งสร้างพันธะไฮโดรเจนซึ่งกันและกันมากขึ้นและเส้นเดี่ยวทั้งสองมีความคล้ายคลึงกันมากขึ้น วิธีนี้ยังสามารถใช้เพื่อตรวจหาลำดับเบสที่เฉพาะเจาะจงในส่วนผสมของดีเอ็นเอเพื่อจุดประสงค์นี้ชิ้นส่วนดีเอ็นเอที่สร้างขึ้นเทียมสามารถติดฉลากด้วยสีย้อม (เรืองแสง) สิ่งเหล่านี้ทำหน้าที่ทำเครื่องหมายลำดับฐานที่สอดคล้องกันและสามารถทำให้มองเห็นได้